Antibióticos Antineoplásicos
7.2.3 mAb-Enediyne Drugs
Os antibióticos antitumor enediyne com actividades antitumorais altamente potentes são produzidos por uma variedade de microrganismos.43 Os antibióticos enediyne foram divididos em duas subfamílias, incluindo enediynes cíclicas com nove membros, como a kedarcidina, LDM, maduropeptina e enediynes cíclicas com dez membros, como as calicheamicinas, esperamicinas e dynemicinas. Os enedianos cíclicos de nove membros são compostos pelo cromóforo e apoproteína com ligação não-vigalente. Estes antibióticos enediyne são um dos agentes antitumorais mais potentes e têm uma arquitetura molecular única, mecanismos de ação intrincados e atividades biológicas notáveis, produzindo quebras simples e duplas no DNA.44 A maioria dos antibióticos enediyne tem atividades rápidas e fortes contra as células cancerígenas e exibe uma atividade antitumoral muito maior (100 a 1000 vezes) em relação aos medicamentos de quimioterapia amplamente utilizados, como a adriamicina. O uso direto dos antibióticos enediyne como antitumor é geralmente limitado devido à falta de especificidade das células tumorais.45 É altamente desejável gerar compostos enediyne modificados com melhor especificidade e propriedades farmacológicas. O mAb fornece especificamente o agente citotóxico às células tumorais e maximiza seu efeito antitumoral e minimiza sua exposição normal ao tecido, resultando em um melhor índice terapêutico. Vários conjugados mAb-enediyne têm demonstrado promessa clínica e sucesso na quimioterapia dirigida ao câncer.46
GO (Mylotarg) consiste de um anticorpo humanizado anti-CD33 (hP67.6) ligado à N-acetil-gama calicheamicina 1,2-dimetil-dicloreto de hidrazina. Uma vez que o anticorpo se liga ao antígeno de superfície, ele é rapidamente internalizado. A calicamicina, uma potente enediina, é subsequentemente libertada e actua como um agente antitumoral citotóxico. Mylotarg foi aprovado pela FDA dos EUA em 2000 para uso como monoterapia em pacientes com 60 anos de idade ou mais com LMA recaída. Em estudos clínicos, Mylotarg demonstrou eficácia contra a LMA, embora tanto o medicamento quanto o ligante usado para ligá-lo ao mAb sejam relativamente instáveis sob condições fisiológicas, e a preparação seja altamente heterogênea, com apenas ~50% do mAb de fato existente na forma conjugada.47 O agente único GO e combinações com quimioterápicos padrão têm sido amplamente explorados na LMA. Hepatotoxicidade e mielossupressão retardada são limitantes de dose. Seu perfil de toxicidade é reduzido com doses reduzidas de GO e até mesmo com a administração de apenas uma infusão. A imunoterapia orientada com GO para tratamento de LMA tem produzido remissões. O GO tem uma toxicidade aceitável e produz taxas de resposta próximas de 30%. A eficácia do GO em monoterapia e terapia combinada para o tratamento de LMA tanto de novo como de LMA recidivante permanece em investigação. A fim de reduzir a toxicidade e melhorar a eficácia, a sua dose e programação ideais e o seu emparelhamento com outros agentes quimioterápicos padrão precisam ser definidos em grandes ensaios clínicos.
Até agora, um número de conjugados tumorais-alvo de calicamicina ligados à mAb contra vários alvos tumorais estão sendo explorados para as suas aplicações terapêuticas. CMC-544 é um imunoconjugado específico para CD22 de calicamicina e mAb que liga a CD22 humana com alta afinidade e causa potente atividade citotóxica contra células B malignas CD22-positivas. O CMC-544 previne o estabelecimento de linfonodos linfonodos de células B humanas subcutâneas e também causa regressão de linfonodos de células B pequenas e grandes estabelecidos em ratos nus. O CMC-544 consegue a sobrevivência a longo prazo de ratos com linfoma de células B disseminadas sistemicamente. Estes resultados apoiam a aplicação clínica do CMC-544 como um agente terapêutico específico no tratamento das neoplasias malignas CD22-positivas de células B. O CMC-544 foi avaliado em ensaios clínicos em pacientes com NHL de células B.48 O efeito do CMC-544, um anti-CD22 mAb conjugado com calicamicina, foi analisado em relação ao CD22 e P-glycoprotein (P-gp) em leucemia linfocítica crônica de células B (CLL) e NHL in vitro. As linhas celulares utilizadas foram a CD22-posi parental Daudi e Raji, e suas sub-linhas P-gp positivas, Daudi/MDR e Raji/MDR. Também foram utilizadas células obtidas de 19 pacientes com CLL de célula B ou NHL. O CMC-544 não foi eficaz nas células de Daudi/MDR e Raji/MDR, em comparação com as células parentais. Os modificadores MDR, PSC833 e Ms209, restauraram o efeito citotóxico do CMC-544 nas sub-linhas P-gp-expressoras. Em amostras clínicas, o efeito citotóxico do CMC-544 foi inversamente relacionado à quantidade de P-gp (P=0,003) e ao acúmulo intracelular de rodamina123 (P<0,001). Por outro lado, o efeito correlacionou-se positivamente com a quantidade de CD22 (P=0,010). O efeito do CMC-544 depende dos níveis de CD22 e P-gp. Estes achados ajudarão a prever a eficácia clínica deste medicamento sobre estas malignidades das células B, sugerindo um efeito benéfico com o uso combinado de CMC-544 e modificadores MDR.
O composto CMB-401 é um imunoconjugado constituído de mAb hCTM01 dirigido contra a mucina epitelial polimórfica covalentemente ligado ao antibiótico calicheamicina citotóxica por um amide linker.26 O CMB-401 mostrou a morte dirigida de células MUC1-expressoras in vitro e produziu efeitos antitumorais pronunciados relacionados à dose em uma faixa de oito vezes contra um MUC1-expressor de carcinoma de ovário xenograft (OvCar-3). CMB-401 foi altamente ativo nos modelos com regimes de dose única ou múltipla e causou regressões completas nas doses mais altas. Em ensaios clínicos, a CMB-401 foi avaliada como monoterapia para o tratamento do carcinoma epitelial ovariano recorrente da platina (EOC).25 Após uma dose IV inicial de hCTM01 (sem calicamicina), a CMB-401 ligada à calicamicina (16 mg/m2 IV) foi administrada durante 60 minutos por até sete ciclos, com 4 semanas entre os ciclos. Dezenove pacientes foram avaliados. As alterações mensuráveis observadas após a administração da CMB-401 não preencheram os critérios para RP. A CMB-401 não foi eficaz como monoterapia para este tipo de EOC. A DTM foi atingida a 16 mg/m2. CMB-401 parece ter um perfil de toxicidade aceitável com atividade demonstrável contra EOC.49 Eventos adversos experimentados pelos pacientes no estudo incluíram náusea, astenia, dor abdominal, dor de cabeça, anorexia e diarréia, na maioria das vezes em um nível de toxicidade de 1 ou 2. Com base em dados publicados sobre a eficácia dos conjugados que administram calicheamicina através de ligadores híbridos (bifuncionais), sugere-se que o amide linker usado na CMB-401 pode ter contribuído para a sua incapacidade de induzir RP em pacientes. O uso de ligadores híbridos para o alvo hCTM01 a EOC pode justificar investigação adicional.
Antitumor antibiótico LDM, originalmente chamado C1027, que é isolado do filtrado de caldo de Streptomyces globisporus C1027 mostra citotoxicidade extremamente potente contra células cancerosas humanas cultivadas e marcada inibição em tumores transplantáveis em modelos animais.50,51,52 O LDM é composto por uma apoproteína e um cromóforo,53 e o peso molecular do primeiro é de 10.500 Da. Com base na estrutura da holoproteína, os mecanismos putativos para a estabilização e a liberação do cromóforo são executados pela apoproteína.54 A meia beta-tirosina do cromóforo pode desempenhar um papel importante para a estabilização do sistema enediyne e a dissociação do cromóforo da apoproteína funcionaria como o gatilho. O LDM com arquitetura molecular única seria um promissor candidato à droga “ogiva”. Em termos de valores de IC50, a citotoxicidade do LDM para o carcinoma do cólon humano HT-29 era 10.000 vezes mais potente que a da mitomicina C e adriamicina. Usando vários métodos para ligar o LDM ao mAb contra as células hepatoma, dois tipos de imunoconjugados são preparados: (1) um conjugado direto é feito ligando LDM a mAb; (2) um conjugado montado é feito por dois passos, ligando e reconstituindo, nos quais a apoproteína é conjugada a mAb e então o cromóforo é adicionado ao conjugado mAb-apoproteína. O ensaio clonogênico mostra que a citotoxicidade do conjugado montado é muito mais forte que a do conjugado direto.55 O experimento in vivo mostra que o conjugado imunoconjugado montado inibe seletivamente e altamente o crescimento tumoral em comparação com o LDM livre.56
O conjugado 3G11-LDM foi preparado ligando a mAb 3G11 modificada de 2-iminothiolane contra a mAb 3G11 de lisina-69 de apoproteína LDM por SPDP ou SMBS como o ligador intermediário do medicamento.57 O 3G11 mostrou imunoreatividade positiva no carcinoma do cólon, fibrossarcoma, hepatoma e imunoreatividade negativa nos tecidos não-malignos adjacentes.58 O 3G11-LDM manteve a imunoreatividade do 3G11 contra a colagenase tipo IV, inibiu a atividade de secreção da colagenase tipo IV e mostrou citotoxicidade extremamente potente em comparação com o LDM livre. No modelo animal, a 3G11-LDM suprimiu notavelmente o crescimento do hepatoma 22 e fibrossarcoma HT-1080, e aumentou o tempo de sobrevivência de ratos portadores de tumor. Além disso, a eficácia antitumoral e o tempo de sobrevivência do conjugado foram superiores aos do LDM livre e/ou do 3G11. O conjugado 3G11-LDM mostra efeitos antitumor muito mais fortes do que a dose equivalente de LDM livre e pode ter um potencial terapêutico promissor no tratamento do câncer.