Compararea efectului antifungic al gelului de Aloevera și al Triphala: Un studiu in vitro Jain S, Mujoo S, Daga M, Kalra S, Nagi R, Laheji A

ARTICOL ORIGINAL

Anul : 2017 | Volum : 29 | Număr : 2 | Pagină : 90-94

Compararea efectului antifungic al gelului Aloevera și al Triphala: Un studiu in vitro
Supreet Jain1, Sheetal Mujoo2, Minal Daga3, Salona Kalra4, Ravleen Nagi1, Afshan Laheji5
1 Departamentul de medicină orală și radiologie, New Horizon Dental College and Research Institute, Bilaspur, Chhattisgarh, India
2 Departamentul de medicină orală și radiologie, Colegiul de Stomatologie, Universitatea din Jazan, Arabia Saudită
3 Departamentul de Stomatologie conservatoare și Endodonție, New Horizon Dental College and Research Institute, Bilaspur, Chhattisgarh, India
4 Departamentul de Medicină orală și Radiologie, Triveni Institute of Dental Sciences Hospital and Research Centre, Bilaspur, Chhattisgarh, India
5 Departamentul de patologie orală și maxilo-facială, Daswani Dental College, Kota, Rajasthan, India

Adresa de corespondență:
Supreet Jain
Departamentul de medicină orală și radiologie, New Horizon Dental College and Research Institute, Sakri, Bilaspur, Chhattisgarh
India

Sursa de susținere: Niciuna, Conflict de interese: None

Check

DOI: 10.4103/jiaomr.JIAOMR_167_16

Rezumat

Scop: Scopul prezentului studiu a fost de a determina și compara activitățile antifungice și inhibitorii ale diferitelor concentrații de Aloevera gel și Triphala împotriva Candiada albicans orală. Materiale și metode: Ciupercile (C. albicans) au fost izolate de la 10 pacienți cu candidoză pseudomembranoasă și de la pacienți cu stomatită dentară și au fost transferate în bulion Sabouraud, care a fost ulterior incubat în agarul de dextroză Sabouraud (SDA). Activitatea antifungică a gelului de Aloevera și a Triphala a fost testată prin metoda difuziei pe disc, iar concentrația minimă inhibitorie a fost determinată prin metoda microdiluției în bulion. Rezultate: Valoarea medie a zonei de inhibiție pentru Aloevera a fost de 3,35 ± 0,59 mm și de 1,06 ± 0,41 mm la 100% și, respectiv, 50%. Pentru Triphala, aceasta a fost de 4,19 ± 0,57 mm și 1,79 ± 0,43 mm la 100% și, respectiv, 50% (valoare P < 0,001). Zona de inhibiție a Triphala 100% a prezentat o valoare mai mare decât cea a Aloevera la aceeași concentrație (P = 0,004). Rezultate similare au fost obținute la concentrația de 50% de Triphala și Aloevera (P = 0,004). Concentrația minimă inhibitorie a gelului de Aloevera și a Triphala împotriva C. albicans a fost de 25% și, respectiv, 12,5%. Concluzii: Aloevera gel și Triphala au prezentat ambele proprietăți antifungice la concentrații mai mari și pot fi folosite ca un adjuvant promițător pentru agenții antifungici.

Cuvintele cheie: Antifungic, cultură, natural

Cum se citește acest articol:
Jain S, Mujoo S, Daga M, Kalra S, Nagi R, Laheji A. Compararea efectului antifungic al gelului Aloevera și Triphala: Un studiu in vitro. J Indian Acad Oral Med Radiol 2017;29:90-4

How to cite this URL:
Jain S, Mujoo S, Daga M, Kalra S, Nagi R, Laheji A. Compararea efectului antifungic al gelului Aloevera și Triphala: Un studiu in vitro. J Indian Acad Oral Med Radiol 2017 ;29:90-4. Disponibil la: https://www.jiaomr.in/text.asp?2017/29/2/90/217911

Introducere

Candida este un gen de drojdii și este cea mai frecventă cauză a infecției fungice orale. Majoritatea speciilor de Candida sunt comensale inofensive sau endosimbionți inofensivi ai gazdelor, inclusiv ai omului; cu toate acestea, atunci când există un sistem imunitar compromis sau când barierele mucoaselor sunt perturbate, ele pot invada și provoca boli. Candida albicans este cea mai frecvent izolată specie și este responsabilă pentru afte bucale, candidoză pseudomembranoasă.
Costul, efectele secundare și rezistența crescută la medicamentele antifungice disponibile în comerț i-au determinat pe cercetători să exploreze remediile naturale pe bază de plante împotriva infecțiilor fungice, Plantele medicinale utilizate în mod tradițional sunt o sursă bogată de agenți antimicrobieni și sunt ușor disponibile în zonele rurale. Ele sunt relativ mai ieftine decât medicina modernă. Produsele metaboliților secundari, produse de plantele medicinale, sunt o sursă importantă de multe medicamente farmaceutice.
Aloevera este o plantă asemănătoare unui cactus care aparține familiei Liliacea. Aloevera gel este un gel mucilaginos incolor, secretat de celulele parenchimatoase ale frunzelor proaspete de Aloevera. Acesta conține 98-99% apă și 1-2% compuși activi, cum ar fi aloina, aloe-emodin, aloemannan, flavonoide, aloesină, steroli, aminoacizi și vitamine. Triphala înseamnă trei fructe, este o formulă ayurvedică indiană care cuprinde Terminali chebula, T. Belerica și Phyllantus embelica în proporție de 1:1:1., Constituenții săi fitochimici sunt taninul, acidul galic, acidul elagic, fenolul și glicozidele. Atât Aloevera, cât și Triphala au proprietăți antibacteriene, antioxidante, antifungice, antiinflamatorii și imunomodulatoare,, Efectele extractelor de Aloevera și Triphala asupra infecției orale cu Candida au fost studiate de foarte puțini cercetători din India. Scopul studiului a fost de a determina activitățile antifungice și inhibitorii ale diferitelor concentrații de gel de Aloevera și Triphala împotriva C. albicans.

Materiale și metode

Studiul a fost realizat în cadrul Departamentului de Microbiologie, New Horizon Dental College and Research Institute, Bilaspur. Autorizația etică a fost obținută de la comitetul etic instituțional. Consimțământul în cunoștință de cauză a fost luat de la toți pacienții. S-a prelevat un tampon de Candida de la pacienții care sufereau de candidoză pseudomembranoasă cu ajutorul stomatitei dentare și s-a transferat în bulionul Sabouraud . Toate izolatele de Candida au fost confirmate prin testul în tub de germeni și testul de germinare a sporilor. Această probă de Candida izolată a fost incubată în agar Sabouraud de dextroză SDA (laboratoarele HIMEDIA, Mumbai) la 4°C.

Figura 1: Creșterea Candida în bulionul Sabouraud Click aici pentru a vizualiza

Prepararea extractului de Aloevera
Epiderma groasă a frunzei proaspete de Aloevera a fost îndepărtată, iar gelul mucilaginos solid a fost colectat într-un recipient steril . Zece milimetri de gel au fost amestecați în 100 ml de 1% dimetilsulfoxid (DMSO) și păstrați la 4°C. DMSO (≤1%) are un efect nesemnificativ asupra dezvoltării ciupercilor și, prin urmare, a fost utilizat ca solvent.

Figura 2: Extracția gelului de Aloevera din frunze proaspete în placă sterilă Click here to view

Prepararea extractului de Triphala
O sută de grame de Triphala churna (Dabur Triphala churna) a fost amestecată în 100 ml de apă pentru a obține o soluție apoasă . Apoi, această soluție a fost fiartă timp de 45 min. Ulterior, a fost răcită și filtrată. Acest filtrat a fost utilizat pentru a verifica efectul antifungic. Proprietatea antifungică a gelului de Aloevera și a Triphala a fost detectată prin metoda de difuzie a discurilor.

Figura 3: Triphala churna Click aici pentru a vizualiza

Activarea Candida albicans
Sporii fungici au fost împrăștiați pe o placă de agar dextroză de cartof (PDA) și incubați la 37°C timp de 24 de ore înainte de testare. Toate plăcile (n = 10) au fost menținute la 4°C pentru utilizare ulterioară.
Metoda de difuzie a discurilor
În fiecare placă (n = 10 pentru Candida) care avea C. albicans activată au fost forate puțuri de opt milimetri cu un burghiu de 8 mm în agar însămânțat în care s-a turnat 100%, 50%, 25% și 12,5% de extract de gel de Aloevera. În mod similar, pentru Triphala, în fiecare placă (n = 10 pentru Triphala) având C. albicans activată, au fost forate godeuri de 8 mm cu un burghiu de 8 mm în agar însămânțat în care s-a turnat 100%, 50%, 25%, 12,5% de extract de Triphala. După ce s-a normalizat la temperatura camerei, plăcile au fost incubate la 37°C timp de 24 de ore. Zona de inhibiție a fost măsurată și înregistrată .

Figura 4: (a) Zona de inhibiție la concentrația de 100% de Triphala. (b) Zona de inhibiție la o concentrație de 50% de Triphala. (c) Zona de inhibiție la o concentrație de 100% de Aloevera. (d) Zona de inhibiție la o concentrație de 50% de Aloevera Click aici pentru a vizualiza

Concentrația minimă inhibitorie
Concentrația minimă inhibitorie (CMI) a fost realizată prin metoda diluției în microbroth. Cea mai mare diluție care nu a produs nicio colonie fungică a fost luată drept CMI. Extractele de Aloevera au fost amestecate cu 1% DMSO pentru a obține diferite concentrații ale stocului, și anume 100%, 50%, 25%, 12,5% și 6,25%. În mod similar, s-au obținut diferite concentrații de Triphala prin amestecarea extractului cu apă distilată. Un volum egal din diferitele concentrații ale fiecărui extract și au fost amestecate în microtuburi (bulion de dextroză Sabouraud) pentru a obține 0,5 ml de soluție. Tuburile au fost incubate la 37°C timp de 24 de ore. Ulterior, diluția de testare a fost subcultivată pe SDA și incubată timp de 24 de ore pentru a verifica creșterea fungică .

Figura 5: Concentrația minimă inhibitorie pentru Triphala și Aloevera Click aici pentru a vizualiza

Analiză statistică
Datele au fost compilate în MS Office Excel. Analiza statistică a fost efectuată cu ajutorul pachetului software SPSS versiunea 21 (SPSS Statistics for Windows, Version 21.0. Chicago: SPSS Inc.). Testul de analiză a varianței (ANOVA) a fost efectuat pentru comparații intra și intergrup. Testul post hoc (Tukey HSD) a fost, de asemenea, efectuat pentru a compara diferitele concentrații de Aloevera, Triphala și ambele. Rezultatele au fost măsurate ca medie ± SD. Valoarea P mai mică de <0,05 a fost considerată ca fiind semnificativă din punct de vedere statistic, iar <0,001 ca fiind foarte semnificativă.

Rezultat

Eșantioanele de Candida recoltate au fost analizate prin colorare Gram, care a evidențiat prezența unor grupuri de pseudohifae sugerând specia C. albicans. Valoarea medie a zonei de inhibiție pentru Aloevera a fost de 3,35 ± 0,59 mm și de 1,06 ± 0,41 mm la 100% și, respectiv, 50%. Pentru Triphala, aceasta a fost de 4,19 ± 0,57 mm și 1,79 ± 0,43 mm la 100% și, respectiv, 50%. Atât Triphala, cât și Aloevera gel au prezentat proprietăți antifungice la concentrații mai mari (concentrație de 100% și 50%, valoare P < 0,001).

Tabelul 1: Valoarea medie a zonei de inhibiție a Aloevera și Triphala la diferite concentrații Click aici pentru a vizualiza

A fost observată o diferență foarte semnificativă între 100% și 50% Aloevera (P< 0,001, t = 19,17). Rezultate similare au fost observate pentru 100% și 50% Triphala (P< 0,001, t = 31,58) . Atunci când s-a efectuat ANOVA, gradul de libertate între Aloevera și Triphala a fost de 3, iar în cadrul grupurilor (100% v/s 50%) a fost de 36 . La testul Post hoc, zona de inhibiție a Triphala 100% a arătat o valoare mai mare decât Aloevera la aceeași concentrație (P = 0,004). Rezultate similare au fost obținute la concentrația de 50% de Triphala și Aloevera (P = 0,000) . La concentrații mai mici (25% și 12,5%), nu a existat niciun efect împotriva Candida. CMI a gelului de Aloevera și a Triphala împotriva C. albicans a fost de 25% și, respectiv, 12,5%.

Tabelul 2: Testul t al lui Student pentru a arăta comparația în cadrul grupului Click aici pentru a vizualiza

Tabelul 3: Testul t al lui Student pentru a arăta comparația în cadrul grupului Click aici pentru a vedea

: Testul ANOVA care arată gradul de libertate între grupuri și în cadrul grupului Click here to view

Tabel 4: Testul post hoc (Tukey HSD) care arată comparația în cadrul grupurilor Click aici pentru a vizualiza

Discuție

Emergența bacteriilor și ciupercilor multidrog rezistente (MDR) și costul ridicat al medicamentelor farmaceutice au necesitat dezvoltarea de medicamente alternative din surse naturale și din alte surse. Plantele medicinale, care sunt utilizate din cele mai vechi timpuri în Ayurveda, ar putea fi una dintre aceste alternative, deoarece sunt ieftine, sigure și sunt eficiente împotriva multor microbi. Mulți cercetători au verificat efectul antibacterian al Aloevera și al Triphala… Foarte puține studii au fost efectuate pentru a verifica efectul antifungic al acestor plante împotriva infecției candidiale orale.,,,,,, Studiul de față a fost efectuat pentru a determina activitățile antifungice și inhibitorii ale diferitelor concentrații de Aloevera gel și Triphala împotriva C. albicans. În studiul de față, atât Triphala, cât și Aloevera au prezentat proprietăți anticandidale la concentrații de 100% și 50%. Nu au fost observate modificări semnificative la concentrații mai mici (25% și 12,5%).
Sheta et al. au folosit 0,5% DMSO și apă distilată ca solvent și au amestecat Triphala (suspensie) pentru a obține o concentrație finală de 100 mg/ml. Aceștia au constatat că zona de inhibiție pentru Triphala împotriva Candida a fost de 12 mm atunci când apa a fost folosită ca solvent și de 20 mm atunci când s-a folosit DMSO ca solvent. Autorii au verificat, de asemenea, proprietatea antifungică a DMSO și au constatat că acesta nu are niciun efect antifungic. Aceștia nu au fiert suspensia de apă, ceea ce ar putea fi cauza unor rezultate mai bune decât cele din studiul nostru. Randhawa a sugerat că DMSO crește permeabilitatea celulei prin legarea cu membrana celulară, provocând astfel un efect sinergic cu medicamentele anticandidale. În cazul prezentat, apa a fost utilizată ca solvent pentru Triphala. El-Mekkawey et al. au constatat că T. chebula poate inhiba speciile de Candida (inclusiv C. albicans rezistentă la clotrimazol). Malhotra et al. în studiul lorin vitro au constatat că unitățile formatoare de colonii (CFU) de C. albicans au scăzut la zero după 10 minute prin utilizarea unei ape de gură cu 6% Triphala.
Khaing a constatat că extractul etanolic de Aloevera nu are niciun efect anticandidal. Un studiu similar realizat de Kaur et al. a arătat că Aloevera este eficientă împotriva C. albicans. Aceștia au sugerat că un rezultat pozitiv în studiul lor s-ar putea datora modificării procedurii de extracție a gelului, și anume, au extras gelul la temperatura camerei, în timp ce un studiu anterior a extras gelul la 90°C. Prin urmare, componenta activă ar fi putut fi pierdută în extractul etanolic dacă extracția a fost făcută la o temperatură mai mare.
Un studiu realizat de Stanley et al. a constatat că zona de inhibiție pentru Aloevera împotriva C. albicans a fost de 4 mm și CMI a fost de 50%, ceea ce a fost similar cu studiul de față. Shireen et al. au constatat că proprietatea antifungică a Aloevera este dependentă de doză. Ei au luat suc de Aloevera (1000, 500, 250, 100 μg) din frunze proaspete și l-au amestecat cu 10 ml de etanol. Zona de inhibiție a fost de 14 mm împotriva C. albicans la o concentrație de 1000 μg, care a fost comparabilă cu amfotericina B. Chainani et al. au folosit extractul etanolic de Triphala și au constatat că acesta a prezentat un efect anticandidal la o concentrație de 5% și peste. Triphala a prezentat rezultate mai bune în comparație cu Aloevera, cu o zonă de inhibiție mai mare atât la concentrația de 100%, cât și la cea de 50%. Mai mult, Triphala inhibă creșterea Candida la o concentrație mai mică (12,5%) în comparație cu Aloevera (50%).
Efectul antimicrobian al Aloevera este atribuit componentei naturale numite antrachinone (emodin, acid aloetic, aloină, antracenă, antranol, barbaloin, acid crisofanic, ulei eteric, ester al acidului cinamic, izobarbaloin și resistannol)., Proteina de aloe purificată de 14 kDa din gelul de frunze de Aloevera a prezentat o activitate antifungică puternică împotriva C. albicans. efectul antifungic al Triphala se datorează celor două componente ale sale .
Am constatat că atât Triphala cât și Aloevera au prezentat activitate antifungică împotriva C. albicans. Cu toate acestea, mecanismul de acțiune al acestor agenți pe bază de plante asupra microbilor nu a fost încă înțeles. În plus, sunt necesare mai multe studii pe diferite încărcături fungice și diferite concentrații atât de Triphala, cât și de Aloevera pentru a verifica potența acestora împotriva diferitelor specii de Candida.

Concluzie

Creșterea numărului de agenți patogeni fungici, opțiunile terapeutice limitate, efectele secundare ale medicamentului terapeutic și apariția MDR reprezintă împreună o povară pentru pacienții cu imunitate compromisă. C. albicans este cea mai frecventă infecție oportunistă a cavității bucale, frecvent izolată din probele de țesut ale pacienților afectați. Medicamentele tradiționale au folosit produse vegetale încă din antichitate. Datorită ușurinței cu care sunt disponibile și a efectului lor mai puțin toxic, s-au depus eforturi pentru a dezvolta opțiuni terapeutice folosind molecule din surse vegetale. Acest studiu reprezintă, de asemenea, un efort similar pentru a verifica efectele antifungice ale Triphala și Aloevera. În acest studiu, s-a constatat că Aloevera și Triphala prezintă activitate antifungică.
Limitări
Studiul de față a fost efectuat in vitro și a implicat un eșantion de dimensiuni mici. În viitor, ar trebui efectuate mai multe studii pe o populație mai mare (in vivo) pentru a dovedi eficacitatea antifungică a Aloevera și Triphala împotriva C. albicans, pentru a caracteriza mecanismul de acțiune în vederea transpunerii ulterioare în utilizarea clinică și a depăși provocările terapeuticii fungice.
Sprijin financiar și sponsorizare
Nimic.
Conflicte de interese
Nu există conflicte de interese.

	Rathod M, Das N, Dhale D. Activitatea antifungică a două plante medicinale împotriva ciupercii Candida albicans. Int J Pharma Bio Science 2015;6:701-6.
	Martins C, Silva D, Neres A, Magalha T, Watanabe G, Modolo L, et al. Curcumin as a promising antifungal of clinical interest. J Antimicrob Chemother 2009;63:337-9.
	Fani M, Kohanteb J. Inhibitory activity of Aloe vera gel on some clinically isolated cariogenic and periodontopathic bacteria. J Oral Sci 2012;54:15-21.
	Vogler BK, Ernst E. Aloe vera: O analiză sistematică a eficacității sale clinice. Br J Gen Pract 1994;9:823-8.
	Ahmad I, Mehmood Z, Mohammad F. Screening of some Indian medicinal plants for their antimicrobial properties. J Ethnopharmacol 1998;62:183-93.
	Wadhwan R, Sharma S, Solanki G, Solanki R. Role of triphala in dentistry: O revizuire. Int J Preclinical Pharmaceutical Res 2014;2:95-9.
	Kammoun M, Miladi S, Ali YB, Damak M, Gargouri Y, Bezzine S.In vitro study of the PLA2 inhibition and antioxidant activities of Aloe vera leaf skin extracts. Lipids Health Dis 2011;10:30.
	Shetty PJ, Hegde V, Gomes L. Anticandidal efficacy of denture cleansing tablet, Triphala, Aloe vera, and Cashew leaf on complete dentures of institutionalized elderly. J Ayurveda Integr Med 2014;5:11-4.
	Randhawa MA, Aljabre SHM. Dimethyl Sulfoxide (DMSO) are un efect aditiv și modifică concentrațiile minime inhibitorii ale medicamentelor antifungice. J Rawalpindi Med College 2007;11:54-60.
	Harringtom A, McCourtney K, Nowowiejski D, Limaye A. Differentiation of Candida albicans yeast direct from blood cultures by gram stain morphology. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2007;26:325-9.
	El-Mekkawey M, Merelhy M. Inhibitory effects of Egyptian folk medicine on Human Immunodeficiency Virus (HIV) reverse transcriptase. Chem Pharm Bull 1995;43:641-8.
	Sheta MM, Kikani KM, Kavithia P, Thakkar J, Rangnani T. Study of antimicrobial activity of Triphala and its individual components. Int J Herb Med 2016;4:41-3.
	Malhotra A, Malhotra I, Solanki R, Khangwal M, Kumar D. Evaluation of antibacterial and antifungal properties of herbal mouthwashw- A prospective study. Int J Enhanced Res Med Dent Care 2015;2:33-7.
	Khaing TA. Evaluarea activităților antifungice și antioxidante ale extractului de frunze de Aloe vera (Aloe barbadensis Miller). World Acad Sci Engineer Tech 2011;5:3-23.
	Kaur H, Goyal RR, Bhattacharya A, Gupta R, Lal NK, Arora B, et al. Antifungal activity of phyto-extracts of Piper Longum, Aloevera, and Withania somnifera against human fungal oportunistic pathogen Candida albicans. DU J Undergrad Res Innov 2015;1:107-15.
	Stanley MC, Ifeanyi OE, Eziokwu OG. Efectele antimicrobiene ale Aloevera asupra unor agenți patogeni umani. Int J Curr Microbiol App Sci 2014;3:1022-8.
	Shireen F, Manipal S, Prabhu D. Antifungal activity of aloevera:In vitro study. SRM J Res Res Dent Sci 2015;6:92-5.
	Chainani S, Siddana S, Reddy CV, Thippeswamy M, Maurya M, Rudraswami S. Activitatea antimicrobiană a Triphala asupra Lactobacilli și candida albicans: Un studiu in vitro. J Orofac Sci 2015;7:104-7.
	Pandey R, Mishra A. Antibacterial activities of crude extract of Aloe barbedensis to clinically isolated bacterial pathogens. Appl Biochem Biotechnol 2010;160:1356-61.

Figuri

, , , , ,