Apotransferrin internaliseras och distribueras på samma sätt som holotransferrin i K562-celler

Transferrin (Tf), ett naturligt existerande protein, har fått stor uppmärksamhet inom området för läkemedelsmålinriktning eftersom det är biologiskt nedbrytbart, icke-toxiskt och icke-immunogent. Det effektiva cellulära upptaget av Tf visar att det har potential när det gäller att leverera cancerläkemedel, proteiner och terapeutiska gener till prolifererande maligna celler som överuttrycker transferrinreceptorn (TfR). I humant serum finns cirka 30 % av Tf i järnmättad form (Fe(2)-Tf) och resten i form av apotransferrin (apo-Tf). Förståelsen av cellernas upptag av apo-Tf kommer att ge viktiga insikter i studier av Tf-medierad läkemedelstillförsel. I denna studie undersökte vi visuellt transporten av apo-Tf till K562-celler och dess intracellulära lokalisering med hjälp av laserskanningskonfokalmikroskopi (LSCM) och flödescytometrianalys (FCA). Det visade sig att apo-Tf i likhet med Fe(2)-Tf kan tas upp i cellerna. Processen är tids- och temperaturberoende, kompetitivt hämmad av Fe(2)-Tf och signifikant avskaffad av förbehandling med pronas. Visuella bevis visade att transporten av apo-Tf till K562-celler är en TfR-medierad process. Undersökningar med hjälp av optisk skivningsteknik visade dessutom att fördelningen av apo-Tf liknar fördelningen av Fe(2)-Tf, och att båda förekommer i den perinukleära regionen i boll-i-skål-form.