UNSUPPORTED BROWSER. PLEASE UPGRADE YOUR BROWSER TO IE 9 OR HIGHER
Az AltaBioscience aminosav-analízis szolgáltatása két fő elemzési típust kínál, az “összes” és a “szabad” elemzést, a minták széles skálájára.
Az elemzés típusai: fehérjékben kötött aminosavak vagy szabad egységként létező aminosavak.
A teljes aminosav-analízis meghatározza a fehérjékben kötött aminosavakat, valamint azokat az aminosavakat, amelyek önálló, nem kötött egységként lehetnek jelen.
A szabad aminosav analízis az egyes nem kötött, azaz a fehérjében nem kötött egyedi aminosavak mennyiségét határozza meg.
Egyes alkalmazásoknál mindkét analízisre szükség lehet a kötött és nem kötött aminosavak különbségének meghatározásához.
Teljes aminosav analízis
Ha egy fehérje vagy peptid aminosav összetétele érdekel, vagy ha a minta teljes fehérjekoncentrációjára van szükség, akkor ez a módszer a választás. A mintában lévő fehérjéket és/vagy peptideket savas hidrolízissel lebontják az egyes aminosavakra, a kivonat tehát az oldatban szabad és a hidrolízis előtt a fehérjékbe beépült aminosavak összege. A hidrolizátumban lévő aminosavakat a kimutatás előtt nátrium-citrát pufferrendszerrel választjuk szét.
Ez a módszer a 20 standard aminosav közül 18-at mér.
1. ábra. Példa egy fehérje-hidrolizátum (nátrium) rendszerrel elválasztott aminosav-standard kromatogramjára
A kriptofán és a cisztin általában elveszik a savas hidrolízis során, azonban becslések adhatók ezekre az aminosavakra, ha a szekvencia ismert. A triptofán vagy cisztin specifikus mennyiségi meghatározására külön kiegészítő vizsgálati módszerek állnak rendelkezésre.
Szabad aminosavak elemzése
A fiziológiai folyadékok, például szérum vagy sejtnövesztő közegek elemzésére a fehérjékbe vagy peptidekbe beépült aminosavak nem érdekesek, és az egyes nem kötött aminosavak koncentrációjára van szükség.Ezért a fehérjét és a zavaró vegyületeket eltávolítják, így az aminosavak szabadon maradnak az oldatban. A szabad aminosavakat ezután lítium-citrát pufferrendszerrel választják el a kimutatás előtt. Ez a nagy felbontású módszer akár 40 komponenst is számszerűsít, beleértve számos nem szabványos aminosavat.
2. ábra. Példa egy fiziológiai (lítiumos) rendszerrel elválasztott aminosav-standard kromatogramjára
Az általunk nyújtott aminosav-analitikai szolgáltatással kapcsolatos további információkért kérjük, lépjen kapcsolatba velünk.
E: [email protected] T: +44 (0)1527 584495
Szerző: Szerző: Sarah Hawker, vezető elemző