UNSUPPORTED BROWSER. PLEASE UPGRADE YOUR BROWSER TO IE 9 OR HIGHER
AltaBioscience aminosyreanalysetjeneste tilbyder to hovedtyper af analyser, “total” og “fri”, for en bred vifte af prøver.
Typer af analyser: for aminosyrer bundet i proteiner eller aminosyrer, der findes som frie enheder.
Total aminosyreanalyse bestemmer de aminosyrer, der er bundet i proteiner, samt de aminosyrer, der kan være til stede som individuelle ubundne enheder.
Fri aminosyreanalyse bestemmer mængden af hver enkelt ubundet individuel aminosyre, dvs. som ikke er bundet i et protein.
I visse anvendelser kan det være nødvendigt med begge analyser for at bestemme forskellen på bundne og ubundne aminosyrer.
Total aminosyreanalyse
Hvis aminosyresammensætningen af et protein eller peptid er af interesse, eller hvis den samlede proteinkoncentration i en prøve er påkrævet, er dette den foretrukne metode. Proteinerne og/eller peptiderne i prøven nedbrydes ved syrehydrolyse til deres individuelle aminosyrer, og ekstraktet er derfor en sum af de aminosyrer, der var frie i opløsningen, og de aminosyrer, der tidligere var indarbejdet i proteinerne inden hydrolysen. Aminosyrerne i hydrolysatet adskilles ved hjælp af et natriumcitratbuffersystem før detektion.
Denne metode måler 18 af de 20 standardaminosyrer.
Figur 1. Eksempel på kromatogram af en aminosyrestandard, der er separeret på proteinhydrolysat (natrium)-systemet
Tryptofan og cystin går normalt tabt under syrehydrolyse, men der kan dog gives skøn for disse aminosyrer, når sekvensen er kendt. Til specifik kvantificering af tryptofan eller cystin findes der særskilte supplerende testmetoder.
Fri aminosyreanalyse
Til analyse af prøver som f.eks. fysiologiske væsker, herunder serum eller cellevækstmedier, er de aminosyrer, der er inkorporeret i proteiner eller peptider, ikke af interesse, og det er koncentrationen af de enkelte ubundne aminosyrer, der er nødvendig.Derfor fjernes proteinet og de forstyrrende forbindelser, så aminosyrerne er frie i opløsning. De frie aminosyrer adskilles derefter ved hjælp af et lithiumcitratbuffersystem før detektion. Med denne højopløsningsmetode kan op til 40 komponenter kvantificeres, herunder mange ikke-standardiserede aminosyrer.
Figur 2. Eksempel på kromatogram af en aminosyrestandard adskilt på det fysiologiske (lithium) system
For yderligere oplysninger om den aminosyreanalysetjeneste, vi tilbyder, bedes du kontakte os.
E: [email protected] T: +44 (0)1527 584495
Forfatter:
Sarah Hawker, Senior Analyst