NanoHybrids – Konjugace protilátek pro zlaté nanočástice

Zlaté nanočástice konjugované s protilátkami umožňují studium a vizualizaci buněčných a molekulárních procesů in vitro a in vivo; jedná se o důležitý nástroj pro výzkumníky v oblasti základních věd i pro klinické lékaře.
Mnoho výzkumníků tráví nadměrný čas a energii vlastní syntézou těchto konjugátů s různou mírou úspěšnosti a nekonzistentními výsledky. Většina z nich zjišťuje, že při provádění konjugací vlastními silami trpí nekonzistentní vazbou protilátky na částici a nereprodukovatelnou účinností značení buněk.
Řešení prvního problému nekonzistentní vazby protilátky na částici vyžaduje jednak:
(1) vytvoření stabilní vazby mezi částicí a protilátkou a
(2) správnou charakterizaci vazby protilátky.

Pro vytvoření stabilní vazby by měly být protilátky kovalentně navázány na povrch. Níže uvedené schéma ukazuje několik různých metod konjugace protilátek.

Fyzikální adsorpční metoda je nejméně stabilní. Spoléhá na afinitu určitých funkčních skupin na proteinech, jako jsou aminy a thioly, které jsou přitahovány nekovalentními interakcemi k povrchu částic. V prostředí in vivo nebo dokonce v buněčných médiích mohou být fyzikálně adsorbované protilátky snadno vytěsněny.
Proto je metoda kovalentní konjugace nejpoužívanějším režimem. Zajišťuje stabilní vazbu mezi nanočásticí zlata a protilátkou a lze použít několik různých chemikálií, například N-hydroxysukcinimid (NHS) ve spojení s 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) karbodiimidem (EDC). Ačkoli však tato metoda vytváří stabilní vazbu, musí být ještě charakterizována.

Směrová konjugace pro lepší účinnost

Charakterizace zlatých nanočástic konjugovaných s protilátkou obvykle zahrnuje odhad poměru protilátky k částicím porovnáním měření fluorescence částic konjugovaných s protilátkou značenou fluoroforem se známými standardy protilátek značených fluoroforem. Samotné měření může být komplikováno zhášením fluoroforu na povrchu kovové nanočástice. Kromě toho musí výzkumníci také připravit protilátku konjugovanou s fluoroforem a její standardy.

NanoHybridy mohou používat metodu směrové konjugace, která mnohé z těchto problémů zmírňuje.
Pro umožnění směrové konjugace je jeden konec molekuly heterobifunkčního síťovače navázán na Fc oblast protilátky. Druhý konec linkeru se váže přímo na povrch nanočástice zlata, čímž zajišťuje směrovou vazbu mezi protilátkou a částicí. Pomocí této metody se realizuje stabilní vazba mezi částicí a protilátkou, přičemž variabilní oblast (Fv) nebo místo interakce s antigenem zůstává stericky neomezené a dostupné pro vazbu.
Směrová povaha vazby umožňuje důslednější charakterizaci poměru mezi protilátkou a částicí a také zvyšuje účinnost značení buněk a molekulární cílení. Účinnost značení lze zvýšit 7 až 10krát při použití směrové metody připevnění ve srovnání s metodou nesměrovou. Použití směrově konjugovaných zlatých nanočástic může přinést významné úspory nákladů, zvýšit produktivitu a urychlit vědecké objevy.

Služby konjugace protilátek na zakázku

Naše zlaté nanočástice můžeme konjugovat s protilátkami, proteiny nebo jinými molekulami podle vašeho výběru. Poskytujeme také technickou podporu výzkumníkům, kteří si chtějí zakoupit naše zlaté nanočástice a pracovat na konjugacích. Kontaktujte nás ještě dnes pro vaše požadavky na konjugaci na zakázku.

.