UNSUPPORTED BROWSER. PLEASE UPGRADE YOUR BROWSER TO IE 9 OR HIGHER
AltaBioscience aminozuur analyse service biedt twee belangrijke soorten analyses, ’totaal’ en ‘vrij’, voor een diverse reeks monsters.
Typen analyse: voor aminozuren gebonden in eiwitten of aminozuren die bestaan als vrije entiteiten.
Totaal aminozuur analyse bepaalt de aminozuren die zijn gebonden in eiwitten, evenals die aminozuren die aanwezig kunnen zijn als individuele ongebonden eenheden.
Vrije aminozuur-analyse bepaalt de hoeveelheid van elk ongebonden individueel aminozuur, d.w.z. niet gebonden in een proteïne.
Sommige toepassingen kunnen beide analyses vereisen om het verschil in gebonden en ongebonden aminozuren te bepalen.
Totale aminozuur-analyse
Wanneer de aminozuursamenstelling van een proteïne of peptide van belang is, of als de totale proteïneconcentratie van een monster vereist is, dan is dit de methode van keuze. De proteïnen en/of peptiden in het monster worden door zuurhydrolyse afgebroken tot hun afzonderlijke aminozuren, zodat het extract een som is van de aminozuren die vrij in oplossing waren en die welke vóór hydrolyse in de proteïnen waren opgenomen. De aminozuren in het hydrolysaat worden vóór de detectie gescheiden met behulp van een natriumcitraat-buffersysteem.
Deze methode meet 18 van de 20 standaardaminozuren.
Figuur 1. Voorbeeldchromatogram van een aminozuurstandaard gescheiden op het proteïnehydrolysaat (natrium) systeem
Tryptofaan en cystine gaan gewoonlijk verloren bij zuurhydrolyse, maar er kunnen schattingen worden gegeven voor deze aminozuren als de sequentie bekend is. Voor specifieke kwantificering van tryptofaan of cystine zijn afzonderlijke aanvullende testmethoden beschikbaar.
Vrije aminozuuranalyse
Voor de analyse van monsters zoals fysiologische vloeistoffen, met inbegrip van serum of celgroeimedia, zijn de aminozuren die in eiwitten of peptiden zijn opgenomen niet van belang, en is het de concentratie van de afzonderlijke ongebonden aminozuren die vereist is.Daarom worden de eiwitten en storende verbindingen verwijderd, waardoor de aminozuren vrij in oplossing blijven. De vrije aminozuren worden vervolgens gescheiden met behulp van een lithiumcitraat-buffersysteem vóór de detectie. Deze methode met hoge resolutie kwantificeert tot 40 componenten, waaronder vele niet-standaard aminozuren.
Figuur 2. Voorbeeldchromatogram van een aminozuurstandaard gescheiden op het fysiologische (lithium) systeem
Voor meer informatie over de aminozuuranalysedienst die wij leveren, kunt u contact met ons opnemen.
E: [email protected] T: +44 (0)1527 584495
Auteur: Sarah Hawker, Senior Analist