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El servicio de análisis de aminoácidos de AltaBioscience ofrece dos tipos principales de análisis, ‘total’ y ‘libre’, para una diversa gama de muestras.

Tipos de análisis: para aminoácidos unidos a proteínas o aminoácidos existentes como entidades libres.

El análisis de aminoácidos totales determina los aminoácidos que están unidos a proteínas así como aquellos aminoácidos que pueden estar presentes como unidades individuales no unidas.

El análisis de aminoácidos libres determina la cantidad de cada aminoácido individual no ligado, es decir, no ligado a una proteína.

Algunas aplicaciones pueden requerir ambos análisis para determinar la diferencia de aminoácidos ligados y no ligados.

Análisis de aminoácidos totales

Cuando la composición de aminoácidos de una proteína o péptido es de interés, o si se requiere la concentración total de proteínas de una muestra, éste es el método de elección. Las proteínas y/o péptidos de la muestra se descomponen por hidrólisis ácida en sus aminoácidos individuales, por lo que el extracto es una suma de los aminoácidos que estaban libres en la solución y de los que estaban previamente incorporados a las proteínas antes de la hidrólisis. Los aminoácidos dentro del hidrolizado se separan utilizando un sistema tampón de citrato de sodio antes de la detección.

Este método mide 18 de los 20 aminoácidos estándar.

Figura 1. Ejemplo de cromatograma de un estándar de aminoácidos separado en el sistema de hidrolizado de proteínas (sodio)

El triptófano y la cistina suelen perderse durante la hidrólisis ácida, sin embargo, pueden darse estimaciones para estos aminoácidos cuando se conoce la secuencia. Para la cuantificación específica del triptófano o la cistina, se dispone de métodos de análisis adicionales separados.

Análisis de aminoácidos libres

Para el análisis de muestras como los fluidos fisiológicos, incluidos el suero o los medios de crecimiento celular, los aminoácidos incorporados a las proteínas o los péptidos no son de interés, y lo que se requiere es la concentración de los aminoácidos individuales no unidos. Los aminoácidos libres se separan entonces utilizando un sistema de tampón de litio-citrato antes de la detección. Este método de alta resolución cuantifica hasta 40 componentes, incluyendo muchos aminoácidos no estándar.

Figura 2. Ejemplo de cromatograma de un estándar de aminoácidos separado en el sistema fisiológico (litio)

Para más información sobre el servicio de análisis de aminoácidos que ofrecemos, póngase en contacto con nosotros.

E: [email protected] T: +44 (0)1527 584495

Autor: Sarah Hawker, Analista Senior