UNSUPPORTED BROWSER. PLEASE UPGRADE YOUR BROWSER TO IE 9 OR HIGHER

AltaBiosciencen aminohappoanalyysipalvelu tarjoaa kaksi pääanalyysityyppiä, ”kokonaisanalyysi” ja ”vapaa analyysi”, monenlaisille näytteille.

Asianalyysityypit: proteiineihin sitoutuneille aminohapoille tai vapaina kokonaisuuksina esiintyville aminohapoille.

Kokonaisanalyysi aminohapoista määrittää aminohapot, jotka ovat sitoutuneina proteiineihin sekä aminohapot, joita voi esiintyä yksittäisinä sitomattomina yksikköinä.

Vapaiden aminohappojen analyysi määrittää kunkin sitoutumattoman yksittäisen aminohapon määrän eli sen, joka ei ole sitoutunut proteiiniin.

Jossain sovelluksissa saatetaan tarvita molempia analyysejä sidottujen ja sitoutumattomien aminohappojen eron määrittämiseksi.

Kokonaisaminohappoanalyysi

Mikäli proteiinien tai peptidien aminohappokoostumuksen koostumusta halutaan tietää, tai jos näytteen proteiinien kokonaiskonsentraatio halutaan saada selville, tämä menetelmä on suositeltava. Näytteessä olevat proteiinit ja/tai peptidit hajotetaan happohydrolyysin avulla niiden yksittäisiksi aminohapoiksi, joten uute on summa aminohapoista, jotka olivat vapaita liuoksessa, ja niistä aminohapoista, jotka olivat aiemmin liittyneet proteiineihin ennen hydrolyysiä. Hydrolysaatissa olevat aminohapot erotetaan toisistaan natriumsitraattipuskurijärjestelmän avulla ennen detektiota.

Menetelmällä mitataan 18 aminohappoa 20:stä standardiaminohaposta.

Kuva 1. Aminohappojen määritysmenetelmä. Esimerkkikromatogrammi aminohappostandardista, joka on erotettu proteiinihydrolysaatti (natrium) -järjestelmällä

Tryptofaani ja kystiini häviävät yleensä happohydrolyysin aikana, mutta näille aminohapoille voidaan kuitenkin antaa arvioita, kun sekvenssi tunnetaan. Tryptofaanin tai kystiinin spesifistä kvantifiointia varten on saatavilla erillisiä lisämääritysmenetelmiä.

Vapaiden aminohappojen analyysi

Vapaiden aminohappojen analyysissä

Vapaiden aminohappojen analyysissä, kuten fysiologisten nesteiden analyysissä, mukaan luettuna seerumi tai solujen kasvualustat, proteiineihin tai peptidien sisäänrakennetut aminohapot eivät ole kiinnostavia, vaan yksittäisten sitomattomien aminohappojen konsentraatioita tarvitaan.Sen vuoksi proteiini ja häiritsevät aineet poistetaan, jolloin aminohappot jäävät vapaiksi. Vapaat aminohapot erotetaan sitten litiumsitraattipuskurijärjestelmällä ennen detektiota. Tällä korkean resoluution menetelmällä kvantifioidaan jopa 40 komponenttia, mukaan lukien monet epätyypilliset aminohapot.

Kuva 2. Esimerkkikromatogrammi fysiologisella (litium) järjestelmällä erotetusta aminohappostandardista

Jos haluat lisätietoja tarjoamastamme aminohappoanalyysipalvelusta , ota yhteyttä.

E: [email protected] T: +44 (0)1527 584495

Author: Sarah Hawker, vanhempi analyytikko