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Le service d’analyse des acides aminés d’AltaBioscience offre deux types principaux d’analyse, « totale » et « libre », pour une gamme diverse d’échantillons.

Types d’analyse : pour les acides aminés liés aux protéines ou les acides aminés existant en tant qu’entités libres.

L’analyse des acides aminés totaux détermine les acides aminés qui sont liés aux protéines ainsi que les acides aminés qui peuvent être présents en tant qu’unités individuelles non liées.

L’analyse des acides aminés libres détermine la quantité de chaque acide aminé individuel non lié, c’est-à-dire non lié dans une protéine.

Certaine application peut nécessiter les deux analyses pour déterminer la différence entre les acides aminés liés et non liés.

Analyse des acides aminés totaux

Lorsque la composition en acides aminés d’une protéine ou d’un peptide est intéressante, ou si la concentration totale en protéines d’un échantillon est requise, c’est la méthode de choix. Les protéines et/ou les peptides dans l’échantillon sont décomposés par hydrolyse acide en leurs acides aminés individuels, l’extrait est donc une somme d’acides aminés qui étaient libres en solution et ceux qui étaient précédemment incorporés dans les protéines avant l’hydrolyse. Les acides aminés contenus dans l’hydrolysat sont séparés à l’aide d’un système tampon au citrate de sodium avant la détection.

Cette méthode mesure 18 des 20 acides aminés standard.

Figure 1. Exemple de chromatogramme d’un acide aminé standard séparé sur le système d’hydrolysat de protéines (sodium)

Le tryptophane et la cystine sont généralement perdus pendant l’hydrolyse acide, cependant, des estimations peuvent être données pour ces acides aminés lorsque la séquence est connue. Pour la quantification spécifique du tryptophane ou de la cystine, des méthodes de test supplémentaires distinctes sont disponibles.

Analyse des acides aminés libres

Pour l’analyse d’échantillons tels que les fluides physiologiques, y compris le sérum ou les milieux de croissance cellulaire, les acides aminés incorporés dans les protéines ou les peptides ne sont pas intéressants, et c’est la concentration des acides aminés individuels non liés qui est requise.Par conséquent, les protéines et les composés interférents sont éliminés, laissant les acides aminés libres en solution. Les acides aminés libres sont ensuite séparés à l’aide d’un système tampon au lithium-citrate avant la détection. Cette méthode à haute résolution quantifie jusqu’à 40 composants, y compris de nombreux acides aminés non standard.

Figure 2. Exemple de chromatogramme d’un acide aminé standard séparé sur le système physiologique (lithium)

Pour plus d’informations sur le service d’analyse des acides aminés que nous fournissons , veuillez nous contacter.

E : [email protected] T : +44 (0)1527 584495

Auteur : Sarah Hawker, Analyste senior