Regular ArticleAngiotensin II Modulates ANP-R2/ANP-C Receptor-mediated Inhibition of Adenylyl Cyclase in Vascular Smooth Muscle Cells: Role of Protein Kinase C☆

W obecnych badaniach badano modulację receptora przedsionkowego peptydu natriuretycznego (ANP) podtypu R2 (ANP-R2/ANP-C) sprzężonego z systemem transdukcji sygnału cyklazy adenylowej/cAMP przez angiotensynę II (angII). C-ANF4-23 i AngII hamowały aktywność cyklazy adenylowej w sposób zależny od stężenia w komórkach mięśni gładkich naczyń (VSmc A-10). Maksymalne obserwowane inhibicje wynosiły odpowiednio około 40 i 30%, z pozornym Kiof około 1 i 10 nm. Wstępne traktowanie komórek AngII powodowało osłabienie hamowania cyklazy adenylowej zarówno przez C-ANF4-23, jak i AngII, bez zmiany wiązania -ANF. Poziom białek Giα-2 i Giα-3, określony metodą immunoblottingu, był również zwiększony przez leczenie AngII. Ponadto leczenie AngII stymulowało fosforylację Giα2, ale nie Giα3 czy receptora ANP-C, co wykazano metodą immunoprecypitacji białek z użyciem specyficznych przeciwciał po wstępnym znakowaniu komórek ortofosforanem. Staurosporyna i chelerytryna, inhibitory kinazy białkowej C (PKC) o długości fali odpowiednio 1 i 100 nm, zapobiegały desensybilizacji cyklazy adenylowej wrażliwej na C-ANF4-23 wywołanej przez AngII. Ponadto, fosforylacja białka Giα2 wywołana przez AngII była również częściowo hamowana przez staurosporynę o około 35%. Wyniki te sugerują, że osłabienie hamowania aktywności cyklazy adenylowej przez C-ANF4-23 pod wpływem AngII może nie wynikać z downregulacji receptorów lub obniżenia poziomu białek G i może obejmować mechanizmy zależne od PKC.

.