Regular ArticleAngiotensin II Modula ANP-R2/ANP-C Inibição da Ciclase Adenilada em Células Musculares Lisas Vasculares: Papel da Proteína Kinase C☆

Neste estudo, investigamos a modulação do receptor do peptídeo natriurético atrial (ANP) do subtipo R2 (ANP-R2/ANP-C) acoplado ao sistema de transdução de sinal adenilciclase/cAMP pela angiotensina II (angII). C-ANF4-23 e AngII inibiram a atividade da adenilicliclase de forma dependente da concentração nas células musculares lisas vasculares (VSmc A-10). As inibições máximas observadas foram de cerca de 40 e 30%, respectivamente, com um Kiof aparente de cerca de 1 e 10 nm. O pré-tratamento das células com AngII resultou na atenuação das inibições de C-ANF4-23 e AngII-mediadas pela adeniliclase, sem alterar a ligação -ANF. Os níveis de Giα-2 e Giα-3proteínas, determinados por immunoblotting, também foram aumentados pelo tratamento com AngII. Além disso, o tratamento AngII estimulou a fosforilação de Giα2but e não do receptor Giα3or ANP-C, como revelado pela imunoprecipitação das proteínas utilizando anticorpos específicos após a prérotulagem das células com ortofosfato. Os inibidores de Staurosporina e queleritrina, proteína quinase C (PKC) a 1 e 100 nm, respectivamente, impediram a dessensibilização mediada por AngII da adeniliclase C-ANF4-23 sensível. Além disso, a fosforilação mediada por AngII de Giα2protein também foi parcialmente inibida em cerca de 35% pelo tratamento com estaurosporina. Estes resultados sugerem que a atenuação da inibição mediada pela C-ANF4-23 da atividade da adeniliclase por AngII não pode ser atribuída à desregulação dos receptores ou à diminuição dos níveis de G-proteínas, e pode envolver mecanismos dependentes de PKC.