Regular ArticleAngiotensina II modulează inhibiția mediată de receptorul ANP-R2/ANP-C al receptorului ANP-R2/ANP-C al adenililciclazei în celulele musculare netede vasculare: Role of Protein Kinase C☆

În studiile de față, am investigat modularea receptorului de peptidă natriuretică atrială (ANP) de subtip R2 (ANP-R2/ANP-C) cuplat la sistemul de transducție a semnalului adenilciclazei/cAMP de către angiotensina II (angII). C-ANF4-23 și AngII au inhibat activitatea adenililciclazei într-o manieră dependentă de concentrație în celulele musculare netede vasculare (VSmc A-10). Inhibițiile maxime observate au fost de aproximativ 40 și, respectiv, 30 %, cu un Kiof aparent de aproximativ 1 și 10 nm. Pretratarea celulelor cu AngII a dus la atenuarea atât a inhibițiilor mediate de C-ANF4-23 cât și de AngII ale adenililciclazei, fără a modifica legarea -ANF. Nivelurile de proteine Giα-2 și Giα-3, determinate prin imunoblotting, au fost, de asemenea, crescute de tratamentul cu AngII. În plus, tratamentul cu AngII a stimulat fosforilarea Giα2, dar nu și a Giα3 sau a receptorului ANP-C, așa cum a fost evidențiat prin imunoprecipitarea proteinelor folosind anticorpi specifici după ce celulele au fost marcate în prealabil cu ortofosfat. Staurosporina și cheleritrina, inhibitori ai proteinkinazei C (PKC) la 1 și, respectiv, 100 nm, au împiedicat desensibilizarea mediată de AngII a adenilciclazei sensibile la C-ANF4-23. În plus, fosforilarea mediată de AngII a proteinei Giα2 a fost, de asemenea, inhibată parțial cu aproximativ 35% prin tratamentul cu staurosporină. Aceste rezultate sugerează că atenuarea inhibării activității adenililciclazei mediate de C-ANF4-23 de către AngII poate să nu fie atribuită reducerii receptorilor sau scăderii nivelului de proteine G și poate implica mecanisme dependente de PKC.

.