Säännöllinen artikkeliAngiotensiini II moduloi ANP-R2/ANP-C-reseptorin välittämää Adenylylisyklaasin estoa verisuonten sileissä lihassoluissa: Role of Protein Kinase C☆

Tässä tutkimuksessa selvitimme angiotensiini II:n (angII) modulaatiota eteisnatriureettisen peptidin (ANP) R2-alatyypin reseptorin (ANP-R2/ANP-C) kytkeytymisestä adenyylisyklaasi/cAMP-signaalinsiirtojärjestelmään. C-ANF4-23 ja angII estivät adenyylisyklaasiaktiivisuutta pitoisuusriippuvaisesti verisuonten sileissä lihassoluissa (VSmc A-10). Havaitut maksimi-inhibitiot olivat vastaavasti noin 40 ja 30 %, ja näennäinen Kiof oli noin 1 ja 10 nm. Solujen esikäsittely AngII:lla johti sekä C-ANF4-23:n että AngII:n välittämien adenyylisyklaasin inhibitioiden heikkenemiseen muuttamatta -ANF:n sitoutumista. Myös immunoblottauksella määritetyt Giα-2- ja Giα-3-proteiinien tasot kasvoivat AngII-käsittelyn vaikutuksesta. Lisäksi AngII-hoito stimuloi Giα2:n mutta ei Giα3:n tai ANP-C-reseptorin fosforylaatiota, mikä kävi ilmi proteiinien immunoprecipitaatiosta spesifisten vasta-aineiden avulla sen jälkeen, kun solut oli esimerkitty ortofosfaatilla. Staurosporiini ja kelertriini, proteiinikinaasi C:n (PKC) inhibiittorit 1 ja 100 nm:ssä, estivät C-ANF4-23-herkän adenylyylisyklaasin AngII-välitteisen desensitisaation. Lisäksi AngII-välitteinen Giα2-proteiinin fosforylaatio estettiin osittain noin 35 prosentilla staurosporiinikäsittelyllä. Nämä tulokset viittaavat siihen, että AngII:n aiheuttama C-ANF4-23-välitteisen adenyylisyklaasiaktiivisuuden eston heikentyminen ei välttämättä johdu reseptorien alasäätelystä tai G-proteiinien alentuneista tasoista, vaan siihen voi liittyä PKC:stä riippuvaisia mekanismeja.