Lapin albinos
Irritation primaire-peau
Les animaux qui ont été largement utilisés pour la détection des propriétés irritantes des produits chimiques sont le lapin albinos, le cobaye albinos et la souris blanche. Chaque fois qu’un produit chimique est appliqué par voie cutanée de façon répétée, l’objectif du test est de détecter à la fois les effets topiques et systémiques. Lorsque les composés sont absorbés de manière significative par la peau, la DL50 peut être déterminée. Lorsque des lapins sont utilisés, la durée des tests peut varier d’un minimum de 3 jours, impliquant l’application de l’agent à une seule occasion, à une durée pouvant aller jusqu’à 2 ans. Lorsque l’étude est de type prolongé, les animaux sont suivis d’une manière similaire aux études générales prolongées décrites précédemment, c’est-à-dire que les animaux sont soumis à des tests hématologiques, de chimie clinique et d’urine. Lorsque des effets cancérigènes doivent être évalués, les tests cutanés sont prolongés pendant une période de 2 ans, au cours de laquelle l’agent est peint sur la peau au moins deux fois par semaine pendant toute la durée du test.
Le test cutané aigu est généralement un test de 3 jours. Il est effectué sur un nombre limité de lapins albinos qui ont été divisés en deux groupes égaux. La zone du dos de chaque animal s’étendant de la base du cou à l’arrière-train est rasée ou épilée. Dans un groupe, une surface d’environ 2 pouces carrés de peau nue est abrasée par de petites incisions à travers la couche superficielle de cellules, c’est-à-dire que les incisions ne sont pas suffisamment profondes pour perturber le derme ou provoquer des saignements. Si le produit à tester est un liquide, 0,5 ml ou moins du produit est placé sous une compresse de gaze de 1 × 1 in. qui est fixée en place sur la zone rasée de la peau des animaux abrasés et non abrasés. Si l’agent est solide, il est dissous dans un solvant approprié tel que l’huile végétale ou l’eau et 0,5 g de la substance est introduit sous le tampon de gaze. Lorsqu’un solvant est utilisé, un groupe témoin d’animaux exposés uniquement au solvant est inclus dans l’essai. Les animaux sont alors généralement immobilisés dans des cages de contention et le tronc entier de chaque animal est enveloppé dans un liant non absorbant pendant les 24 heures suivantes. Après l’intervalle de 24 heures, le liant et le tampon sont retirés, et la zone d’exposition est évaluée et est réévaluée 48 heures plus tard.
L’évaluation des effets sur la peau implique l’utilisation d’un système de notation pour le degré de rougeur et le degré d’œdème au site d’application du tampon de gaze. Le système de notation utilisé est généralement celui qui a été publié dans le Federal Register à la section 191.11 de la loi fédérale sur les substances dangereuses des États-Unis. Le système de notation implique l’attribution relative de numéros distincts pour le degré d’érythème et le degré de formation d’œdème, comme suit : pas d’érythème, 0 ; érythème léger, à peine perceptible, 1 ; érythème bien défini, 2 ; érythème modéré à sévère, 3 ; et érythème sévère, rouge betterave, avec blessures en profondeur, 4 ; pas d’œdème, 0 ; œdème léger, à peine perceptible, avec bords relevés, 2 ; œdème modéré avec surface relevée d’environ 1 mm, 3 ; œdème sévère avec surface relevée plus qu’avant et s’étendant au-delà de la zone d’exposition, 4. Les scores obtenus pour l’érythème et l’œdème à chaque période de notation et pour la peau abrasée et intacte sont répertoriés et la moyenne pour chaque groupe et pour chaque type d’effet est calculée. Les huit valeurs moyennes sont ensuite additionnées et divisées par 4 puisqu’il y a quatre valeurs moyennes pour chaque effet (érythème et oedème), ce qui donne un chiffre final qui est le score d’irritation primaire. Lorsque la toxicité systémique doit être déterminée en plus de la toxicité locale, les animaux sont traités en une seule occasion comme indiqué ci-dessus, sauf que la zone d’exposition est lavée après le retrait de la compresse de gaze et que les animaux sont suivis pendant les 14 jours suivants pour la mise en évidence d’effets locaux et systémiques.
Dans des études d’administration prolongée et répétée pour des périodes d’une durée de 3 mois, de jeunes lapins albinos des deux sexes sont répartis au hasard en trois groupes de trois à six animaux dans chaque groupe plus un nombre égal d’animaux témoins. La zone d’exposition sur la peau d’au moins deux animaux de chaque groupe est abrasée. Le matériau d’essai est appliqué directement sur la peau 5 jours/semaine pour un total de 60 applications. Le tronc entier de chaque animal est enveloppé comme dans l’essai précédent et l’emballage est fixé avec du ruban adhésif. Des colliers sont placés sur les animaux pour éviter l’ingestion du produit testé. Les effets topiques observés sont notés à intervalles réguliers pendant le test et les animaux sont observés pour détecter les effets systémiques. À la fin de la séquence d’exposition, les animaux sont tués et des nécropsies complètes sont réalisées. Des coupes histologiques de la zone d’exposition de la peau ainsi que de tous les tissus anormaux sont évaluées.
L’étude des effets cancérigènes possibles de l’administration topique répétée d’agents chimiques implique des études dont la durée varie de 3 mois à 2 ans. Les animaux couramment utilisés sont des souris blanches, et l’essai comprend des groupes d’animaux témoins positifs et négatifs, plus un minimum de deux groupes d’essai qui sont affectés à des concentrations de l’agent à dose élevée et à faible dose. Le nombre d’animaux dans chaque groupe est de 25 à 50 mâles et un nombre égal de femelles, tous logés individuellement. La peau de chaque animal est rasée à l’arrière de la base du cou et entre les omoplates. L’agent est peint ou déposé à l’aide d’une pipette sur la peau exposée. À chaque application, le volume de produit appliqué est de 0,1 ml, et les animaux sont traités deux fois par semaine pendant toute la durée de l’expérience. Les animaux qui survivent à l’expérience ainsi que ceux qui tombent malades pendant l’expérience sont autopsiés. Un examen histopathologique est effectué sur tous les tissus comme décrit dans les tests conventionnels de toxicité chronique. Une attention particulière est portée à l’évaluation des animaux au cours de l’étude pour l’apparition et la nature des tumeurs cutanées chez les animaux. Ces tests sont généralement modifiés pour inclure des procédures permettant de détecter si le produit chimique testé agit en initiant ou en favorisant l’apparition de tumeurs.