NEPODPOROVANÝ PROHLÍŽEČ. PLEASE UPGRADE YOUR BROWSER TO IE 9 OR HIGHER
AltaBioscience amino acid analysis service offers two main types of analysis, ‚total‘ and ‚free‘, for diverse range of samples.
Typy analýz: pro aminokyseliny vázané v proteinech nebo aminokyseliny existující jako volné jednotky.
Total amino acid analysis determines the amino acids which are bound in proteins as well as those amino acids that may be present as individual unbound units.
Analýza volných aminokyselin určuje množství každé nevázané jednotlivé aminokyseliny, tj. nevázané v bílkovině.
Některé aplikace mohou vyžadovat obě analýzy, aby se určil rozdíl ve vázaných a nevázaných aminokyselinách.
Analýza celkových aminokyselin
Pokud je předmětem zájmu složení aminokyselin v bílkovině nebo peptidu, nebo pokud je požadována celková koncentrace bílkovin ve vzorku, pak je to metoda volby. Proteiny a/nebo peptidy ve vzorku se rozkládají kyselou hydrolýzou na jednotlivé aminokyseliny, extrakt je tedy součtem aminokyselin, které byly volné v roztoku, a těch, které byly před hydrolýzou začleněny do proteinů. Aminokyseliny v hydrolyzátu se před detekcí oddělí pomocí pufrového systému citrátu sodného.
Tato metoda měří 18 z 20 standardních aminokyselin.
Obrázek 1. Příklad chromatogramu standardní aminokyseliny separované na systému hydrolyzátu bílkovin (sodný roztok)
Tryptofan a cystin se obvykle ztrácejí během kyselé hydrolýzy, nicméně pro tyto aminokyseliny lze uvést odhady, pokud je známa sekvence. Pro specifickou kvantifikaci tryptofanu nebo cystinu jsou k dispozici samostatné doplňkové zkušební metody.
Analýza volných aminokyselin
Pro analýzu vzorků, jako jsou fyziologické tekutiny včetně séra nebo buněčných růstových médií, nejsou aminokyseliny zabudované do proteinů nebo peptidů zajímavé a je požadována koncentrace jednotlivých nevázaných aminokyselin.
Pro analýzu se proto odstraní bílkoviny a rušivé sloučeniny a aminokyseliny se ponechají volné v roztoku. Volné aminokyseliny se pak před detekcí oddělí pomocí lithiumcitrátového pufru. Tato metoda s vysokým rozlišením kvantifikuje až 40 složek, včetně mnoha nestandardních aminokyselin.
Obrázek 2. Příklad chromatogramu standardu aminokyselin separovaného na fyziologickém (lithném) systému
Pro více informací o službě analýzy aminokyselin, kterou poskytujeme , nás prosím kontaktujte.
E: [email protected] T: +44 (0)1527 584495
Author: Sarah Hawker, senior analytička