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Serviço de análise de aminoácidos de AltaBiosciência oferece dois tipos principais de análise, ‘total’ e ‘livre’, para uma gama diversificada de amostras.

Tipos de análise: para aminoácidos ligados em proteínas ou aminoácidos existentes como entidades livres.

Análise total de aminoácidos determina os aminoácidos que estão ligados em proteínas, bem como os aminoácidos que podem estar presentes como unidades individuais não ligadas.

Análise de aminoácidos livres determina a quantidade de cada aminoácido individual não ligado, ou seja, não ligado em uma proteína.

Algumas aplicações podem requerer ambas as análises para determinar a diferença entre aminoácidos ligados e não ligados.

Análise total de aminoácidos

Quando a composição de aminoácidos de uma proteína ou peptídeo é de interesse, ou se a concentração total de proteína de uma amostra é necessária, então este é o método de escolha. As proteínas e/ou peptídeos dentro da amostra são decompostos por hidrólise ácida em seus aminoácidos individuais, portanto o extrato é uma soma de aminoácidos que estavam livres em solução e aqueles que foram previamente incorporados às proteínas antes da hidrólise. Os aminoácidos dentro do hidrolisado são separados usando um sistema tampão citrato de sódio antes da detecção.

Este método mede 18 dos 20 aminoácidos padrão.

Figure 1. Exemplo de cromatograma de um padrão de aminoácidos separado no sistema de hidrolisado de proteínas (sódio)

Tryptophan e cistina são normalmente perdidos durante a hidrólise ácida, no entanto, estimativas podem ser dadas para estes aminoácidos quando a sequência é conhecida. Para quantificação específica de triptofano ou cistina, métodos de teste adicionais separados estão disponíveis.

Análise de aminoácidos livres

Para a análise de amostras como fluidos fisiológicos incluindo soro ou meio de crescimento celular, os aminoácidos incorporados em proteínas ou peptídeos não são de interesse, e é a concentração dos aminoácidos individuais não ligados que é necessária. Os aminoácidos livres são então separados usando um sistema tampão de lithiumcitrate antes de serem detectados. Este método de alta resolução quantifica até 40 componentes, incluindo muitos aminoácidos não padronizados.

Figure 2. Exemplo de cromatograma de um padrão de aminoácidos separado no sistema fisiológico (lítio)

Para mais informações sobre o serviço de análise de aminoácidos que fornecemos , por favor contacte-nos.

E: [email protected] T: +44 (0)1527 584495

Autor: Sarah Hawker, Analista Sênior